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如何確定熒光染料的激發(fā)波長/發(fā)射波長?

2023-05-25 [257]

如何確定熒光染料的激發(fā)波長/發(fā)射波長?

熒光光譜分為:激發(fā)光譜(PLE)和發(fā)射光譜(PL)。

激發(fā)光譜:固定發(fā)射光的波長,改變激發(fā)光的波長,記錄熒光強(qiáng)度隨激發(fā)波長的變化。發(fā)射光譜:固定激發(fā)光的波長,記錄不同發(fā)射波長處熒光強(qiáng)度隨發(fā)射波長的變化。

無論是激發(fā)還是發(fā)射熒光光譜圖,其都是記錄發(fā)射熒光強(qiáng)度隨波長的變化。所以熒光光譜中縱坐標(biāo)為強(qiáng)度,橫坐標(biāo)為波長。首先從圖中能獲取峰位和半峰寬。峰位的直觀體現(xiàn)是熒光的顏色;半峰寬則表示熒光的純度。

因此可以根據(jù)這種熒光素的激發(fā)譜線來確定其激發(fā)波長,根據(jù)其發(fā)射譜來確定其發(fā)射波長。

激發(fā)譜:不同波長的光激發(fā)熒光素后,熒光強(qiáng)度的變化。

發(fā)射譜:同一波長的光激發(fā)熒光素后,各波長下的熒光強(qiáng)度的變化。

一般都取峰值。

其發(fā)射波長會隨激發(fā)波長變嗎?

對不同材料來說不同,絕大多數(shù)情況下,發(fā)射波長會隨著激發(fā)波長的偏移而有所偏移。 對于固態(tài)物質(zhì),主要是因?yàn)榉肿优c其它材料形成了π建,對于量子點(diǎn)溶液,激發(fā)波長也會顯著導(dǎo)致發(fā)射光譜的不同。 但是不是絕對的,比如對于Alex555分子,發(fā)射波長的偏移往往就相對較小,這是由于分子內(nèi)部的能帶結(jié)構(gòu)所決定的。


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Cy3-NHS; Cy3 NHS Ester  146368-16-3

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Cy5   146368-11-8

Cy5-NHS;Cy5 NHS Ester  146368-14-1

Cy5-alkyne 1345823-20-2

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